Рекомендации по забору и доставке биоматериала

Выписка из ИНСТРУКЦИИ по применению набора реагентов для выявления РНК вирусов гриппа А (influenza virus A) и гриппа В (influenza virus B) в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией "АмплиСенс Influenza virus A/B-FL":

"ВНИМАНИЕ! Мазки со слизистой носоглотки и ротоглотки рекомендуется совмещать в одной пробирке и исследовать как один образец. Для этого берут мазки разными зондами сначала со слизистой нижнего носового хода, а затем из ротоглотки, при этом рабочие концы зондов после взятия мазков у пациента помещаются в одну пробирку с 0,5 мл транспортной среды для хранения и транспортировки респираторных мазков и исследуются как один образец."

Правила взятия, транспортировки и хранения сыворотки крови для проведения

иммуноферментного анализа, иммуноблотинга, ПЦР

1. Забор крови производят натощак или не ранее чем через 3 часа после приема пищи из локтевой вены.

2. Для получения и отделения сыворотки рекомендуется использовать для взятия крови вакуумные пробирки с гелем. (Приказ МЗ Челябинской области № 899 от 10.08.2009 г). Пробирки с гелем можно отличить по желтой или красной крышке с желтым кольцом.

Для лучшего отделения сгустка крови от сыворотки в пробирки добавлен гель - специальный материал, предназначенный для образования стойкого барьера между клеточными компонентами крови и сывороткой во время центрифугирования. Специфический удельный вес геля подобран таким образом, что при центрифугировании гель "всплывает" над эритроцитами и располагается между форменными элементами крови и сывороткой. Гель твердеет, и образуется барьер между форменными элементами крови и сывороткой. Устойчивый барьер образуется через 5 минут после окончания центрифугирования пробы. В пробирку с гелем добавлен кремнезем (активатор свертывания), который обеспечивает полное свертывание крови в течение 30 минут.

При использовании пробирок с гелем:

1) увеличивается выход образца (сыворотки);

2) сокращается время проведения анализа;

3) возможно проведение анализа, хранение и транспортировка образца в первичной пробирке. Пробирки можно замораживать до минус 20 градусов;

4) снижается вероятность гемолиза после центрифугирования;

5) снижается присутствие латентного фибрина в сыворотке;

6) отсутствует воздействие на пробу факторов окружающей среды (микроорганизмы, окисление и т.д.), что в конечном итоге повышает качество исследования.

3. Методика взятия крови с помощью вакуумной системы

1. Пробирка маркируется, с указанием Ф.И.О. пациента гелевой ручкой или перманентным маркером.

2. Держа иглу рукой за цветную часть, снять белый защитный колпачок, закрывающий второй конец иглы в резиновом клапане.

3. Ввернуть этим концом иглу в держатель, а затем снять с нее цветной колпачок.

4. Провести пункцию вены из руки, опущенной вниз, как это обычно делается с помощью шприца.

5. Фиксируя держатель левой рукой, вставить вакуумную пробирку в держатель и движением правой руки , напоминающим проталкивание поршня в шприце, ввести пробирку в держатель до прокалывания пробки. Если пункция вены была проведена правильно, кровь начнет поступать в пробирку сразу же после ее установки в держатель до полного заполнения дозированного объема вакуума. Если был наложен жгут, его необходимо снять сразу же после начала поступления крови в пробирку.

6. После прекращения тока крови в пробирку ее необходимо извлечь из держателя. Пробирку легче извлекать, если большой палец правой руки упирается в выступ держателя.

7. Если нужно набрать несколько пробирок для разных анализов, вакуумную пробирку можно легко заменить на следующую. Резиновый клапан на игле препятствует вытеканию крови. Сразу же после взятия крови в вакуумную пробирку с добавками -ее следует несколько раз перевернуть( 5-6 раз), не встряхивая, для лучшего перемешивания крови с реактивом.

8. После взятия проб иглу, не вынимая из держателя, следует сбросить в контейнер для использованных острых предметов.

9. Провести центрифугирование проводится не ранее, чем через 30 мин. после забора крови из вены в лечебном учреждении. Условия центрифугирования: 1500-2000g в течение 10 мин. Если количество оборотов меньше, чем необходимо, гель не поднимется по стенкам пробирки и не будет выполнять роль разделительного элемента. Пробирки с гелем нельзя центрифугировать повторно, так как это может вызвать гемолиз.

В лабораторию направляется не менее 1,5 мл сыворотки.

Время доставки сыворотки в лабораторию не более 1 суток.

До доставки в лабораторию сыворотка должна храниться при температуре + 4 - +6С о .

4. Оформление направления

Текст направления и маркировка на флаконе должны быть написаны аккуратным, легко читаемым почерком.

Высылается один экземпляр направления, заполненный в соответствии с приказом №513 Управления здравоохранения администрации города Челябинска от 28.12.2012 года.

5. Доставка материала в лабораторию

1.Вакуумные пробирки с сывороткой помещаются в контейнер с ячейками (штатив) и доставляются в лабораторию в емкостях (вторичный контейнеры, стерилизационные коробки и др.) с закрывающимися крышками из материала, который не портится при дезинфекции. Дно контейнеров должно быть покрыто адсорбирующим материалом (марлевой салфеткой, ткань, вата и пр.) с дезинфектантом. Вторичный контейнер должен быть промаркирован знаком "Биологическая опасность".

2. Перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования не допускается.

3. Направления упаковывают в полиэтиленовый пакет, который укладывают в отдельный отсек контейнера.

Правила взятия, транспортировки и хранения плазмы

для проведения

количественного определения ДНК/РНК (вирусной нагрузки) возбудителя гепатита В/С методом ПЦР

1. Забор крови производят натощак или не ранее чем через 3 часа после приема пищи из локтевой вены.

2. Для получения и отделения сыворотки рекомендуется использовать для взятия крови вакуумные пробирки с ЭДТА. (Приказ МЗ Челябинской области № 899 от 10.08.2009 г). Пробирки с ЭДТА можно отличить по сиреневой крышке . Применение гепарина в качестве антикоагулянта не допускается.

3. Методика взятия крови с помощью вакуумной системы

1. Пробирка маркируется, с указанием Ф.И.О. пациента гелевой ручкой или перманентным маркером.

3. Ввернуть этим концом иглу в держатель, а затем снять с нее цветной колпачок.

4. Провести пункцию вены из руки, опущенной вниз, как это обычно делается с помощью шприца.

9. Провести центрифугирование проводится не ранее, чем через 30 минут после забора крови из вены в лечебном учреждении.

Условия центрифугирования: 1500g в течение 20 мин.

В лабораторию направляется не менее 1,5 мл плазмы.

Время доставки плазмы в лабораторию не более 1 суток. При отсутствии возможности немедленного ПЦР-анализа образец крови хранится в холодильнике при температуре + 2 - +8° С не более 2-х суток Замораживание образцов не допускается.

4. Оформление направления

Текст направления и маркировка на флаконе должны быть написаны аккуратным, легко читаемым почерком.

5. Доставка материала в лабораторию

1.Вакуумные пробирки с плазмой помещаются в контейнер с ячейками (штатив) и доставляются в лабораторию в емкостях (вторичный контейнеры, стерилизационные коробки и др.) с закрывающимися крышками из материала, который не портится при дезинфекции. Дно контейнеров должно быть покрыто адсорбирующим материалом (марлевой салфеткой, ткань, вата и пр.) с дезинфектантом. Вторичный контейнер должен быть промаркирован знаком "Биологическая опасность".

2. Перевозка материала в сумках, портфелях и других предметах личного пользования не допускается.

3. Направления упаковывают в полиэтиленовый пакет, который укладывают в отдельный отсек контейнера.

Критерии для отказа приема проб:

1. Пробы, собранные в несоответствующие транспортные контейнеры или содержащие несоответствующие консерванты:в случае взятия материала в несоответствующие пробирки или содержащие несоответствующие консерванты, которые могут привести к ошибочным результатам.

2. Недостаточное количество материала: при получении недостаточного количества биологического материала (моча, кровь и т.д.) необходим повторный забор, учитывая правила забора, при котором необходимо взять достаточный объем материала для исследования. Если возникли сложности при обработке приносного материала для исследования (соскоб, ликвор, кровь и др.) то в этом случае оповещается врач, проводивший забор пробы и вместе с ним устанавливаются необходимые исследуемые лабораторные параметры.

3. Неправильно отобранные образцы:при получении материала, отобранного в несоответствии с проводимыми исследованиями (например, слюна вместо соскоба или моча для анализов крови и т.д.), его оформляют в бракеражный журнал. МО, где проводилось взятие материала, предлагают провести повторный забор проб.

4. Неправильно транспортированные или хранившиеся пробы:если время транспортировки материала в лабораторию превышает допустимый интервал времени согласно требованиям, которые предоставляют производители реагентов. Также оформляются в бракеражный журнал и биологические материалы, которые нуждаются в охлаждении, а транспортировались при комнатной температуре, также как и пробы, нуждающиеся в заморозке, а доставленные в лабораторию в размороженном виде.

5. Гемолизированные пробы:некоторые исследования являются некорректными при наличии гемолиза in vitro. При гемолизе сыворотки предлагается провести повторный забор материала. Информирование врача, который направил материал, особенно в случае тяжелых госпитализированных пациентов, является обязательным с целью исключения редких случаев гемолиза in vivo.

ПОСУДА, ИСПОЛЬЗУЕМАЯ ДЛЯ ДОСТАВКИ ПРОБ В ЛАБОРАТОРИЮ МБУЗ ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ ЦЕНТР.

Источник и вид клинического материала

Изделия, используемые для доставки пробы

Кровь на гемокультуру (тифы и паратифы)

двухфазная среда во флаконах.

Кровь на стерильность

Специальные флаконы для аппаратов Bactec, Bactalert. со средой, с нейтрализаторами антибиотиков и реагентами, разрушающими форменные элементы крови, или без них.

Отдельно для культивирования аэробов, анаэробов, грибов.

Отдельно для детей и взрослых.

Центральная нервная система

Стерильные одноразовые емкости с завинчивающейся крышкой.

Материал при абсцессах мозга и биопсийный материал при воспалительных процессах в центральной нервной системе

Шприц с иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку; пробирка с тиогликолевой средой, закрытая стерильной резиновой пробкой; транспортировочные емкости со средой для сохранения анаэробов.

Нижние дыхательные пути

Биопсийный материал легких и трахеи; мокрота, естественно откашливаемая и индуцированная; соскоб с бронхов

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой (для сбора мокроты).

Аспират трахеи, бронхо- альвеолярный лаваж, смывы с бронхов

Стерильная одноразовая емкость для сбора мокроты с завинчивающейся крышкой.

Аспират транстрахеальный и легких

Специальные транспортировочные емкости со средой для анаэробов; шприц с иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку; емкость с тиогликолевой средой; стерильная одноразовая пластиковая емкость с завинчивающейся крышкой; плотно закрывающаяся пробирка.

Верхние дыхательные пути

Мазки из носа, зева, носоглотки, наружного уха

Стерильный одноразовый зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер), или транспортировочная емкость с соответствующей средой.

Назальный смыв, назофагальный аспират

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой.

Жидкость, получаемая при тимпаноцентезе, аспират синуса, получаемые при аспирации иглой

Шприц с иглой, обеззараженной после проведения манипуляции с помощью тампона, смоченного 70%-м этиловым спиртом, и воткнутой в стерильную резиновую пробку; можно перенести материал из шприца в стерильную одноразовую пробирку или специальную емкость со средой для транспортирования анаэробов.

Ткань, получаемая во время операции носа, глотки, уха

Стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой; пробирка с тиогликолевой или другой транспортировочной средой, плотно закрытая стерильной резиновой пробкой; плотно закрытая стерильная одноразовая пластиковая пробирка.

Соскобы с конъюнктивы уголка глаза

Материал, который отбирают в специальный транспортировочный контейнер со средой или засевают в питательную среду.

Материал, который отбирают в специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов или шприц с предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом иглой, воткнутой в стерильную резиновую пробку

Отделяемое, взятое стерильной стеклянной палочкой или стерильным ватным зондом-тампоном со слизистой оболочки нижней переходной складки, с края век, при язве - с роговицы (после обезболивания), при уголковом конъюнктивите - с уголков век

Стерильная одноразовая пробирка с тиогликолевой средой, в которую вмонтирован зонд-тампон, используемый для взятия пробы.

Средняя порция свободно истекающей мочи; из канала подвздошной кишки, использованного для создания искусственного мочевого пузыря; из катетера у реанимационных больных. Смыв из мочевого пузыря. Проба, полученная при билатеральной уретральной катетеризации

Стерильная одноразовая емкость для сбора мочи с завинчивающейся крышкой или стерильная одноразовая пробирка с крышкой; или специальная одноразовая пробирка для сбора мочи (объем пробы 10-20 мл).

Проба, полученная при проведении надлобковой аспирации

Стерильный шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; стерильный шприц с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в резиновую пробку

Материал из женских половых органов

Жидкости: амниотическая, фаллопиевых труб, бартолиновая

Специальная транспортировочная емкость со средой для анаэробов; шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; шприц с иглой, обработанной 70%-м спиртом и воткнутой в стерильную резиновую пробку (объем пробы 1-2 мл)

Пробы из цервикального канала, уретры, влагалища

Одноразовый стерильный зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер) или емкость транспортировочная со специальной средой; зонд-тампон, вмонтированный в целлюлозную или ватно-марлевую пробку стерильной стеклянной пробирки. Предметное стекло с приготовленным мазком для исследования бактериальных инфекций, передаваемых половым путем. Пробирка с транспортировочной средой с активированным углем для сохранения в течение 48 ч. и более

Пробы материала из эндометрия

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой или пробирка, или емкость транспортировочная со средой для анаэробов.

Материал наружных половых органов

Зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) ; специальная транспортировочная пробирка со средой с активированным углем; мазки на предметных стеклах для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем

Материал из мужских половых органов

Мазки из уретры

Зонд-тампон на алюминиевой оси (уретральный зонд-тампон), вмонтированный в стерильные одноразовую (тубсер) или стеклянную пробирки; специальная транспортировочная пробирка со средой с активированным углем; мазки на предметных стеклах для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем.

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; стерильные пробирка или тубсер, одноразовые.

Материал придатков яичка при эпидидимите

Специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов или емкость с тиогликолевой средой; стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой.

Зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер); мазки для обнаружения других возбудителей инфекций, передаваемых половым путем

Зонд-тампон, вмонтированный в стерильную одноразовую (тубсер) ; стерильная одноразовая или стеклянная емкость для сбора смыва из ротовой полости

Желудочный лаваж или промывная жидкость; дуоденальный аспират; проба, получаемая при ректороманоскопии; ректальный биопсийный материал

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; специальный стерильный контейнер для сбора мокроты; стерильная стеклянная емкость; аспират - в стерильном шприце с иглой, предварительно обеззараженной и воткнутой в стерильную резиновую пробку

Одноразовый стерильный зонд-тампон, вмонтированный в стерильную сухую пробирку (тубсер); или стерильная пробирка со специальной транспортировочной средой; зонд-тампон из нержавеющего материала, вмонтированный в целлюлозную или ватно- марлевую пробку стерильной стеклянной пробирки

Фекалии на наличие дисбактериоза по родовому и видовому составу микробов ("на флору")

Специальный транспортировочный контейнер со средой для анаэробов в фекальных образцах, со специальными средами с активированным углем и без него для выделения Campylobacter spр., разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; зонд-тампон в пробирке с физиологическим раствором с глицерином в стерильной одноразовой или стеклянной пробирке; специальный одноразовый стерильный контейнер с завинчивающейся крышкой; стеклянная, смонтированная в лаборатории емкость

Фекалии на наличие дисбактериоза с количественным учетом выделенных и идентифицированных микробов ("на дисбактериоз")

Специальные стерильные одноразовые контейнеры с завинчивающейся крышкой и лопаточкой для сбора материала и отбора пробы для посева, имеющие стандартный вес; смонтированная в лаборатории специальная стерильная стеклянная емкость

Кожа и подкожные ткани

Язвы, узелки (узелковые утолщения), неглубокие, поверхностные раны (гнойные, ожоги); глубокие раны или абсцессы, кости

Специальные стерильные одноразовые контейнеры с завинчивающейся крышкой; стерильные пробирки с пробками одноразовые или стеклянные объемом 5 мл; емкости со специальными средами для анаэробов

Экссудат подкожной и мягких тканей; аспират мягких тканей

Стерильный шприц без иглы, закрытый стерильной резиновой пробкой; шприц с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в резиновую пробку

Стерильные жидкости организма, за исключением крови, ликвора, мочи (см. выше)

Плевральная, перитонеальная, асцитическая, суставная, синовиальная

Стерильная одноразовая емкость с завинчивающейся крышкой; закрытый шприц без иглы или с иглой, предварительно обеззараженной 70%-м этиловым спиртом и воткнутой в стерильную резиновую пробку

Биоматериал для ПЦР-диагностики

Одноразовые шприцы-пробирки (вакутайнеры) с сиреневой крышкой

Ликвор, моча, кал, мокрота

Стерильные одноразовые емкости с завинчивающейся крышкой.

Биопсийный материал; соскобы.

Стерильные сухие одноразовые пробирки типа "Эппендорф" с танспортной средой.

Пробы крови для серологии

Одноразовые шприцы-пробирки (вакутайнеры) с красной или желтой крышкой.

10.Ссылки

Методические указания МУ 4.2.2039-05 "Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории"

Санитарные правила СП 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IVгрупп патогенности»

Санитарные правила СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IVгрупп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных заболеваний».

Санитарные правила СП 1.3.2518-09 «Дополнения и изменения №1 к санитарно-эпидемиологическим правилам «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней. СП 1.3.2322-08»

СанПиН 2.1.3.2630-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к организациям, осуществляющим медицинскую деятельность»

СанПиН 2.1.7.2790-10«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами»

Приказ МЗ СССР от 22 апреля 1985 г. N 535 "Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений".

Приказ МЗ и МП РФ от 19 января 1995 г. N 8 "О развитии и совершенствовании деятельности лабораторий клинической микробиологии (бактериологии) лечебно-профилактических учреждений".

📎📎📎📎📎📎📎📎📎📎