Изучение содержания фипронил-сульфона в тканях крыс при остром и подостром воздействии

Защита среды обитания живых организмов от различных экологически опасных факторов приобретает все большую остроту в связи с увеличивающимися объемами различных загрязнителей, попадающих в окружающую среду. По эффективности биологические методы защиты пока уступают химическим средствам. Поэтому применение пестицидов в ближайшие годы представляется неизбежным и необходимым. /1-3/. Пестициды, в отличие от других антропогенных факторов, сознательно вводятся человеком в биосферу, причем в постоянно возрастающих масштабах, и входят в первую десятку ее загрязнителей /2, 4, 5/. С каждым годом ассортимент и количество пестицидов возрастает.

В настоящее время проблема токсического воздействия пестицидов на здоровье населения и окружающую природу является одной из наиболее актуальных эколого-гигиенических проблем во всем мире, которая усугубляется зачастую бесконтрольным и бессистемным применением пестицидов. Пестициды способны долгое время сохраняться в почве. Мигрируя, они загрязняют поверхностные и подземные воды, почвы, накапливаются в растительных организмах и по пищевой цепочке попадать в организм человека /6/.

В результате действия пестицидов происходит нарушение состава популяций в агро- и биоценозах, уничтожение естественных хищников и паразитов вредителей, негативное влияние на полезную фауну, возникновение устойчивых к пестицидам популяций вредных видов, изменение качества урожая в связи с возможным содержанием в нем остатков ядохимикатов, а также отрицательное действие на генетический аппарат живых организмов /7, 8/.

В связи с вышеизложенным, целью настоящего исследования явилось изучение содержания фипронил-сульфона в печени, почках и мышцах экспериментальных животных.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Объектами исследования явились ткани внутренних органов (печень, почки, мыщцы) белых беспородных крыс-самцов в возрасте 1, 6 и 12 месяцев, получавших фипронил-сульфон (МВ 46136) в дозе 21,8 мг/кг, что соответствует 1/10 ЛД50.

Всего в экспериментах было использовано 30 белых беспородных крыс-самцов в возрасте 1, 6, 12 месяцев, разделенных на 6 групп по 5 крыс в каждой: I-III – животные трех возрастных групп, получавших однократно (острое воздействие) перорально водный раствор фипронил-сульфона; IV-VI – животные трех возрастных групп, получавших в течение 10 дней (подострое воздействие) перорально водный раствор ксенобиотика.

Перед забоем определяли общий вес и вес исследуемых органов каждой крысы. Приготовление материала для газохроматографического анализа проводили по модифицированной методике /9-13/. Пробы из тканей лабораторных животных (печень, почки, мышцы) измельчали и экстрагировали смесью растворителей ацетонитрила и гексана (1:1). Готовые экстракты проб выпаривали в термостате и сухой осадок каждого экстракта растворяли в 200 мкл гексана и вводили в газовый хроматограф (Yuonglin instrument, South Korea) по 1 мкл пробы. Концентрация стандартных растворов фипронил-сульфона составляла 1 мкг/мл гексана.

Условия хроматографии: температура на вводе - 160 C°, скорость потока – 1 мл/мин, дозирование с делением потока – 1:10, колонка – DB 5 - 30 м/0,55 мм, начальная температура – 160 C°, скорость нагрева 1 газоносителя – 1-3, конечная температура 1 – 250 C°, скорость нагрева 2 газоносителя – 2-8, конечная температура 2 - 260 C°, скорость нагрева 3 газоносителя – 3-16, конечная температура 3 газоносителя - 310 C°.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Результаты газохроматографического анализа содержания метаболита фипронил-сульфона в печени, почках и мышцах интоксицированных животных разных возрастных групп представлены в таблице. Установлено наличие фипронил-сульфона (МВ 46136), одного из метаболитов фипронила, в исследуемых органах крыс разного возраста после острого и подострого воздействия.

Из представленных данных видно, что в зависимости от продолжительности воздействия фипронил-сульфона и возраста интоксицированных крыс содержание метаболита меняется. Так, если у животных в возрасте 1 месяца, подвергнутых острому воздействию, его содержание в печени, почках и мышцах составило соответственно 0.027, 0.029 и 0.005 мг/кг массы тела, то у животных в возрасте 6 месяцев – 0.036, 0.042 и 0.006, а у годовалых – 0.055, 0.060 и 0.009 мг/кг массы тела. Несмотря на увеличение с возрастом животных абсолютных чисел, отражающих количество ксенобиотика в изучаемых тканях, достоверное увеличение его содержания наблюдалось только в мышечной ткани годовалых крыс по сравнению с месячными особями, которое увеличилось в 1,8 раза (Р<0.05), что отражено на рисунке 1.

Газохроматографический анализ образцов печени, почек и мышц крыс, интоксицированных в течение 10 дней (подострое воздействие) также выявил наличие метаболита в органах. При этом, достоверное увеличение содержания МВ 46136 в печени в 2,1 (Р<0.01) раза наблюдалось только у 12 месячных крыс по сравнению с месячными животными, а у годовалых по сравнению с полугодовалыми – в 1,8 раза (Р<0.01).

Таблица – Содержание фипронил-сульфона (МВ 46136) в печени, почках и мышцах крыс при остром и подостром воздействии